{"product_id":"entwicklung-eines-reportergen-konstrukts-zur-bestimmung-der-subzellularen-lokalisierung-9786630009514","title":"Entwicklung eines Reportergen-Konstrukts zur Bestimmung der subzellulären Lokalisierung","description":"\u003cp\u003e • Author(s): Biruk Abrha\u003cbr\u003e • Publisher: Verlag Unser Wissen\u003cbr\u003e • Publisher Imprint: Verlag Unser Wissen\u003cbr\u003e • BISAC: Life Sciences - Genetics \u0026amp; Genomics\u003c\/p\u003e\u003cp\u003eDie RNA-Pyrophosphohydrolase (RppH) leitet den Abbau von Transkripten ein, indem sie Pyrophosphat vom 5'-Ende der mRNAs entfernt, was die Bindung von RNase E\/RNase J in Bakterien erm�glicht. In Zellen von C. reinhardtii ist eine mutma liche RNA-Pyrophosphorylase vorhanden, und mehrere Hinweise deuten darauf hin, dass das Protein am mRNA-Abbau im Chloroplasten beteiligt ist. Um den Ort des Proteins in Chlamydomonas-Zellen zu bestimmen, wurde das 5'-Ende des rppH-Gens an ein codonoptimiertes gr�n fluoreszierendes Protein (GFP) gekoppelt und in Chlamydomonas-Zellen eingef�hrt. GFP (Zsgreen 1) wurde unter Verwendung einer Codon-Usage-Datenbank codonoptimiert. Der Leserahmen des optimierten synthetischen GFP wurde angepasst und in den Vektor pBluescript-5'rppH SK+ kloniert. Das 5'rppH-GFP-Genfragment wurde anschlie end in drei Vektoren kloniert. Alle Konstrukte wurden verifiziert. Die Transformanten wurden mittels PCR auf das Vorhandensein des chim�ren GFP-Gens untersucht. Die Screening-Experimente f�hrten dazu, dass wir einen Transformanten ausw�hlten, der f�r die weitere Arbeit verwendet werden konnte. Obwohl die Fluoreszenz nicht �berpr�ft wurde, wurde das optimierte synthetische GFP in E. coli (BL21DE3)-Zellen exprimiert, was die Funktionalit�t des synthetischen GFP-Konstrukts in vivo best�tigte.\u003c\/p\u003e","brand":"Verlag Unser Wissen","offers":[{"title":"Paperback","offer_id":47968715735191,"sku":"9786630009514","price":7340.0,"currency_code":"INR","in_stock":true}],"thumbnail_url":"\/\/cdn.shopify.com\/s\/files\/1\/0666\/3471\/1191\/files\/9786630009514.webp?v=1782919153","url":"https:\/\/atlanticbooks.com\/products\/entwicklung-eines-reportergen-konstrukts-zur-bestimmung-der-subzellularen-lokalisierung-9786630009514","provider":"Atlantic Books","version":"1.0","type":"link"}