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Genom-Editierung mit dem CRISPR-Cas9-System

by Paris Roidos
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Book cover type: Paperback
  • ISBN13: 9786208348281
  • Binding: Paperback
  • Subject: N/A
  • Publisher: Verlag Unser Wissen
  • Publisher Imprint: Verlag Unser Wissen
  • Publication Date:
  • Pages: 56
  • Original Price: GBP 33.0
  • Language: German
  • Edition: N/A
  • Item Weight: 96 grams
  • BISAC Subject(s): Life Sciences / Genetics & Genomics

Die Genomtechnik steht kurz vor dem Beginn ihres goldenen Zeitalters. Neue und aufregende Werkzeuge tauchen auf und erweitern das Arsenal. Nach TALENs und Zing-Fingern kommt nun ein neues und vielversprechendes Werkzeug hinzu. Die neueste Ergänzung ist das CRISPR-System. Ein System, das zuerst bei Streptococcus thermophilus entdeckt wurde und dessen natürliche Rolle die sequenzspezifische adaptive Immunität gegen fremde DNA in Bakterien ist. Im vorliegenden Bericht wird das CRISPR Cas9-System vom Typ II verwendet, um das in Lymphozyten exprimierte HPRT1-Gen auszuschalten, um ein Konzept zu testen. Als Selektionsmedium wird HAT-Medium in Kombination mit Thioguanin verwendet, was ein schnelles und einfaches Auslese-Screeningverfahren ermöglicht. Um zu überprüfen, ob ein erfolgreiches Editing-Ereignis in den Säugetierzellen stattgefunden hat, wird ein DNA-Spaltungskit in Kombination mit einem enzymatischen Assay verwendet.

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